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细胞计数板计算公式

细胞计数板是一种常用的细胞计数工具,常用于生物学实验中对细胞数量进行定量分析。

不同规格的细胞计数板,其计算公式有所差异,下面以最常见的 改良 Neubauer 计数板为例进行介绍: 计算公式 每毫升细胞悬液中细胞数 = ( 四个大方格内细胞总数 / 4 )× 稀释倍数 × 10000 公式解读 四个大方格内细胞总数:在显微镜下,计数计数板上四个角的大方格(每个大方格又分为 16 个小方格)内的细胞总数。

对于压线细胞,遵循“计上不计下,计左不计右”的原则,以保证计数的准确性和一致性。

除以 4:由于取了四个大方格计数,计算平均值可得到每个大方格内细胞的平均数量。

稀释倍数:如果在计数前对细胞悬液进行了稀释,需要乘以相应的稀释倍数,以还原到未稀释前的细胞浓度。

例如,将细胞悬液稀释了 10 倍,则稀释倍数为 10 。

乘以 10000:这是因为计数板每个大方格的容积是 0.1 mm³ ,而 1 ml = 1000 mm³ ,所以 1 mm³ 内的细胞数是每个大方格内细胞平均数的 10 倍( 1mm³÷0.1mm³ = 10 ), 1 ml 内的细胞数就是每个大方格内细胞平均数的 10000 倍( 10×1000 = 10000 )。

举例说明 现有一细胞悬液,取 10 μl 细胞悬液与 90 μl 台盼蓝染液混合(即稀释了 10 倍),然后将混合液滴加到计数板上,在显微镜下计数四个大方格内的细胞总数为 200 个。

代入上述公式可得:每毫升细胞悬液中细胞数 = ( 200 / 4 )× 10 × 10000 = 5000000 个/ml 。