胡萝卜素的提取
样品提取作为分析检测过程中的第一步对其定量分析结果起着至关重要的作用,同样的材料采用不同的提取方法,结果有很大的差异。类胡萝卜素种类繁多,在提取过程中要基于其性质提取,主要的提取方法有:有机溶剂直接提取法、皂化后提取法、超声波辅助提取法等。
1.1 有机溶剂直接提取法
作为一种天然存在的脂溶性维生素,类胡萝卜素不溶于水,易溶于丙酮、正己烷、石油醚、乙醚等有机溶剂,样品中类胡萝卜素的种类及存在形式直接决定了有机溶剂的选择。不同种类的类胡萝卜素极性大小有很大的差异,如叶黄素的极性大于胡萝卜素的极性,根据相似相溶的规律,在极性较强的溶剂中,叶黄素的饱和溶解度一般比较高,非极性溶剂中, 胡萝卜素的溶解度较高。在万寿菊花中绝大多数叶黄素均以酯形1式存在,而非游离态,极性较大的游离叶黄素占16 %,在提取过程中宜选用极性与非极性溶剂配比提取。Vicario 等用甲醇/丙酮/正己烷(1 ∶ 1 ∶ 2,体积比)提取橘汁中的类胡萝卜素。然而,没有一种溶剂能适合所有样品中的类胡萝卜素。
1.2 皂化后提取法
皂化可以使组织中的脂肪水解,纯化用于检测的类胡萝卜素样品;破坏样品的组织细胞,提高类胡萝卜素的提取率;使非游离态的类胡萝卜素转变为游离态的类胡萝卜素,使样品中的类胡萝卜素完全释放出来。皂化后再选取合适的溶剂提取,溶液更容易分层,有利于提取完全,并提高提取率。如Deming 等采用60 ℃、25 min 皂化来提取沙土鼠组织中的类胡萝卜素,李国银等用皂化可以有效去除枸杞果肉中的大部分脂肪酸甘油酯和游离脂肪酸。
1.3 超声波辅助提取法
天然植物成分大多为细胞内产物,提取时往往需要将细胞破碎,而现有的机械或化学破碎方法有时难于取得理想的破碎效果。超声波辅助法在植物有效成分的提取中已显示出了明显的优势。超声波通过溶剂内小气泡的形成和破碎,产生冲击波,在短距离范围内产生高温和高压,可有效破碎生物细胞和组织,能在较短时间内达到高效提取类胡萝卜素的目的。研究表明,超声波辅助提取可大大提高蚕沙中类胡萝卜素的提取率,超声波法提取率是溶剂法提取率的2.04 倍。(图片来源:视觉中国)