尤克里里4根弦的顺序从下到上分别是，一弦、二弦、三弦、四弦，这里的从下到上是指，抱着尤克里里，其中左手握琴头，右手抱着琴身的姿势。调音时，尤克里里的4根弦分别对应，一弦la、二弦mi、三弦do、四弦sol。
尤克里里4根弦只是对应的4个音高，并且这四根弦在首调简谱中分别是6、3、1、5，意思是把尤克里里正面对弹奏者，从右边数，第一根对应的弦简谱是6，音名是A；第二根弦对应的简谱是3，音名是E；第三根弦对应的简谱是1，音名是C；第四根弦对应的简谱是5，音名是G；其中第三根弦是尤克里里最粗的弦。
一般在调音时，我们要调的就是这四根弦的发音，调音之前，我们先将调音器夹在琴头上，并随便弹奏下空弦，如果调音器上显示的指针偏向白屏时，表示音偏低了，指针偏向红色时，表示音偏高，这时再旋转调音手柄将指针调向居中的位置，并且屏幕呈现绿色，音才算调准。