《蒙娜丽莎》是文艺复兴时代画家列奥纳多·达·芬奇所绘的丽莎·乔宫多的肖像画。法国政府把它保存在巴黎的卢浮宫供公众欣赏。2012年7月17日，意大利考古学家日前声称找到了疑似修女丽莎盖拉尔迪尼的遗骨。对《蒙娜丽莎》原型的身份，各界众说纷纭，不过丽莎盖拉尔迪尼即为“蒙娜丽莎”的说法得到普遍认同。英媒称，通过对这具遗骨的还原，或许能帮助人们揭开“蒙娜丽莎微笑之谜”。
500年来，人们一直对《蒙娜丽莎》神秘的微笑莫衷一是。不同的观者或在不同的时间去看，感受似乎都不同。有时觉得她笑得舒畅温柔，有时又显得严肃，有时像是略含哀伤，有时甚至显出讥嘲和揶揄。在一幅画中，光线的变化不能像在雕塑中产生那样大的差别。但在蒙娜丽莎的脸上，微暗的阴影时隐时现，为她的双眼与唇部披上了一层面纱。而人的笑容主要表现在眼角和嘴角上，达·芬奇却偏把这些部位画得若隐若现，没有明确的界线，因此才会有这令人捉摸不定的“神秘的微笑”。荷兰阿姆斯特丹的一所大学应用“情感识别软件”分析出蒙娜丽莎的微笑包含的内容及比例：高兴83%，厌恶9%，恐惧6%，愤怒2%。
哈佛大学神经科专家玛格丽特·利文斯通博士说，蒙娜丽莎的微笑时隐时现，是与人体视觉系统有关，而不是因为画中人表情神秘莫测。利文斯通博士是视觉神经活动方面的权威，主要研究眼睛与大脑对不同对比和光暗的反应。利文斯通说：“笑容忽隐忽现，是由于观看者改变了眼睛位置。”她表示，人类的眼睛内有两个不同部分接收影像。中央部分（即视网膜上的浅窝）负责分辨颜色、细致印记。环绕浅窝的外围部分则留意黑白﹑动作和阴影。据利文斯通说，当人们看着一张脸时，眼睛多数集中注视对方的双眼。假如人们的中央视觉放在蒙娜丽莎的双眼，较不准确的外围视觉便会落在她的嘴巴上。由于外围视觉并不注重细微之处，无形中突出了颧骨部位的阴影。如此一来，笑容的弧度便显得更加大了。不过，当眼睛直视蒙娜丽莎的嘴巴，中央视觉便不会看到阴影。利文斯通说：“如果看着她的嘴巴，便永远无法捕捉她的笑容。”蒙娜丽莎的笑容若隐若现，源于人们的目光不断转移。利文斯通指出，若要临摹《蒙娜丽莎》，描绘口部时便要望着别处。
一直以来，达芬奇的这幅作品不仅仅因为其艺术成就而在国内外享有盛誉，还因为画作中很多细节对人们来说都是“谜一样的存在”而引人关注。比如，画中人物梦幻般的微笑，因其若有若无，时而哀伤忧郁，时而恬静温柔，被认为是“神秘的微笑”而被各方研究。
此外，关于画作中符号及其象征的意义，也是人们探索的问题之一。意大利国家文化遗产委员会去年宣称，人物的右眼球上隐藏着黑色字母“LV”，是列奥纳多·达芬奇姓名首字母的缩写，但左眼的字母尚未探查清楚。画中拱桥上的72被认为可能是年份1472，或者是和用数字命理解读《圣经》内容的“卡巴拉”有关，后者是一个探索造物主与宇宙奥秘之间关系的犹太经典。画中人物左侧更为突出的表现方式，被解读为画家对女性的崇拜。1503年，达芬奇开始对此画的创作，但是，也许直到2503年，这幅画作仍是一个难解的“达芬奇密码”。