主演 枢木朱雀（玖兰枢 ）：由宫野真守配音。
玖兰枢身为玖兰家族的始祖，背负着沉重的使命。
表面上他优雅高贵、冷静沉稳，实际上内心有着复杂的情感和痛苦的过往。
他深爱着优姬，一直在暗中守护她，并为了吸血鬼和人类的和平努力。
黑主优姬：水树 配音。
原本是人类，后被证明是纯血种吸血鬼玖兰枢的妹妹。
性格善良、坚强，在经历了一系列事件后，逐渐接受自己吸血鬼的身份，在人类与吸血鬼的矛盾冲突中挣扎抉择。
锥生零：由樱井孝宏配音。
曾经是优秀的吸血鬼猎人，因家人遭受吸血鬼迫害，对吸血鬼怀有深深的仇恨。
但在与优姬的相处中，感情逐渐发生变化，内心在仇恨与爱意之间不断拉扯。
分集剧情（重点围绕结局部分） 《吸血鬼骑士》动画分为两季，以下按照剧集顺序梳理关键剧情直至大结局： 第一季 第1集：故事开篇，黑主学园分为日间部和夜间部。
女主角黑主优姬和锥生零担任风纪委员，负责维护学园秩序，阻止日间部学生对夜间部吸血鬼学生过度好奇。
优姬在一次意外中救下了被Level E吸血鬼袭击的玖兰枢，从此与吸血鬼的故事正式展开。
第5集：零在执行任务时，遇到了儿时好友红玛利亚，她如今已成为吸血鬼。
零内心的仇恨与对过去的回忆被唤起，同时，优姬发现零对吸血鬼的仇恨背后有着痛苦的经历。
第10集：学园里出现了失控的Level E吸血鬼，引起恐慌。
玖兰枢出手解决危机，但优姬在过程中受伤。
枢用自己的血救了优姬，优姬对枢的感情也在悄然发生变化。
零看到这一幕，心中五味杂陈。
第13集（第一季结局）：零的吸血鬼化进程加速，他对优姬的感情也越发复杂。
玖兰枢告诉优姬，她其实是吸血鬼，并且是自己要守护的重要存在。
优姬震惊之余，开始对自己的身份产生迷茫。
第二季 第1集：优姬在得知自己是吸血鬼后，内心十分挣扎。
玖兰枢将她带到吸血鬼的世界，让她了解自己的身世。
零决心阻止优姬彻底成为吸血鬼，独自踏上寻找解决办法的道路。
第4集：优姬努力适应吸血鬼的生活，但她仍然心系人类和学园。
零在寻找方法的过程中，遇到了神秘组织“元老院”的人，他们试图利用零达到自己的目的。
第7集：“元老院”为了巩固自己的权力，计划对付玖兰枢。
他们派出众多吸血鬼猎人，对枢和优姬展开围堵。
在激烈的战斗中，优姬逐渐展现出强大的纯血种吸血鬼力量。
第9集：零在关键时刻赶到，与优姬、枢并肩作战。
战斗中，零发现自己对优姬的感情难以割舍，但他也明白自己与优姬之间的立场差异。
玖兰枢为了保护优姬，受了重伤。
第10集：优姬看着受伤的枢，内心痛苦万分。
她决定承担起自己作为纯血种吸血鬼的责任，与枢一起面对未来的挑战。
零虽然不舍，但也只能默默祝福。
第11集：优姬和枢回到吸血鬼的领地，准备应对“元老院”的下一步行动。
在此期间，优姬回忆起小时候与枢的点点滴滴，更加坚定了自己守护枢和吸血鬼世界的决心。
第12集：“元老院”联合其他势力，发动了大规模的进攻。
优姬、枢和零带领吸血鬼们奋起反抗。
战斗异常激烈，各方都付出了惨重代价。
第13集（第二季结局，也是动画版大结局 ）：经过艰苦的战斗，优姬和枢成功击退了敌人。
优姬意识到，只有打破人类与吸血鬼之间的隔阂，才能真正实现和平。
于是，她决定离开黑主学园，跟随枢前往吸血鬼的世界，致力于改变两个种族对立的局面。
零选择留在人类世界，继续作为吸血鬼猎人守护人类。
在离别之际，优姬与零互诉衷肠，彼此都带着对对方的思念和祝福，走向不同的道路。
在漫画原著中，故事后续还有更丰富的情节发展和结局走向，但动画版到此结束，留下了令人回味的情感余韵和关于种族和平的思考空间。